时差显微镜培养箱的应用及参数设置-广东精子库

(一)胚胎评估方法常规的胚胎质量评估方法是20世纪80年代建立起来的，即光学显微镜下观察、评估胚胎。依赖于胚胎某时段影像:胚胎卵裂球数、卵裂球对称性、胚胎碎片等因素对胚胎进行析。由于检查的影像数量和时间截点有限，传统2个细胞融合)是胚胎质量较差的标志，但是此类不规则分裂无法通过传统胚胎评估方法检胚胎评估方法存在局限性。例如胚胎直接分裂(从1个细胞分裂成3个细胞)和逆向分裂则。此外，研究显示约50%的胚胎卵裂球数目和形态会在受精后38~42小时内发生变化，从而导致胚胎质量评估出现偏差。分析培养3~5天胚胎的形态未必能反映胚胎真实的活力和发育潜力。相对于常规胚胎评价方法，时差显微镜可记录胚胎的实时发育状态。目前有2种时差成像胚胎分析方法:

1.基于胚胎发育形态的基础评估

该方法记录胚胎每个发育阶段的卵裂球数目、卵裂球的对称性、胚胎空泡、多核化、及不规则分裂等，以此对胚胎进行相应分级。

2.基于胚胎发育动力学的进阶评估

荨法对胚胎进行评分。该方法通过软件记录胚胎实时影像再交由胚胎学家抓取胚胎发育各阶段的时限，搭建

3.基于机器学习的人工智能评估

该方法通过现有的专家经验及共识将第3~5天胚胎影像资料交由计算机分析，自动给出胚胎分析结果，目前对于囊胚的智能评估已有大量文献报道，而对于卵裂期胚胎评估还处于探索阶段。

(二)胚胎培养条件

常规培养箱中培养的胚胎需在显微镜下进行多次形态学观察。培养箱内温度和气体成分条件的改变对胚胎培养不利。而时差显微镜培养箱中培养的胚治不需在培养箱外观察，即还胎封闭培养，不受外界干扰时差显微镜培养箱需使用特定培养皿，以适应实时摄像系统的定位。培养皿是直接接触胚胎的载体，使用需注意:1.培养方式为组培养或独立培养

2.定位内孔内培养基的承载量。

3.定位内孔的直径。

(三)放入时机

1.ICSI后正常受精卵。

2.颗粒细胞充分剥除后的IVF正常受精卵。

3.解冻后卵裂期胚胎或囊胚期胚胎。