辅助生殖实验室温度质量管控

配子和胚胎的温度在体外培养的过程中会受到多个环节的影响，如培养箱、工作站显微镜热台、培养皿、培养液及覆盖组织培养油量、体外操作时间、空气流动等。配子或胚胎的体外操作通常都会经过三个温差的循环急定运行，避免温度波动对胚胎造成不利影响。37℃℃培养箱到室温;室温到加热的显微镜操作台;显微镜操作台到37℃℃的培养箱。我们难人保证胚胎始终处于37℃的微环境中，但可以通过严格的质量管控来保障与温度相关设备的

培养箱质量管控

、

配子和胚胎的大部分时间是在培养箱内完成其体外发育，培养箱的稳定运行是保证F成功率的重要因素。培养箱能够维持培养环境的温度、湿度、气体、培养液pH和渗透压等是培养系统的重要组成部分。常用的大型培养箱可分为水套式加热和气套式加热。水套式培养箱通过一个独立的热水隔间包围箱体来维寺温度;气套式培养箱是通过箱体内加热器直接加热箱内气体。无论使用何种加热系统，大型培养箱内部均存在温度梯度(图2-1)，不同隔层间的温差可达0.2℃℃。虽然这种温度的波动是否会产生影响尚不得而知，但记录培养箱内多个位置的温度可以提供更准确的温度信息，并及时发现可能影响配子及胚胎发育的温度变七。

虽然培养箱可以维持稳定的温度环境，但依然会受到外部环境的影响。如频繁开关箱，外界冷空气进入培养箱，从而使箱内温度下降。因此理论上，每名患者应配备独立培箱以减少开关门对其他患者的影响，从而维持最人一箱。大型水套式培养箱采用水套加热方式稳定的培养环境。但对于年周期量过千的中心这是不现实的，因此桌面式、抽屉式小型培养箱应运而生。多台小型培养箱同时应用，可以减少同一培养箱内患者的数量，甚至实现-有效的热量交换。有研究比较了小型桌面式培养利用热水加热箱体壁面，开关门后需要一定的时间来恢复箱体内的温度;小型桌面式培养洎通过直接加热培养箱中的凹槽使培养容器表面与加热后的培养箱表面保持直接接触，提供示:小型桌面式培养箱在关门后5分钟左右的时间内，箱体和培养皿的温度即可恢复正常箱与传统大型水套式培养箱开门5秒钟后关门培养箱内的温度和氧浓度的变化情况。结果而传统培养箱则需要30分钟左右的时间才可将箱体和培养皿的温度恢复到37℃℃。随后，研究人员进一步将受精卵随机分配到两种培养箱内另外，培养箱应尽量避免置于垂直高效滤器出#行培养发现:小型桌面式培养箱的胚胎卵裂率和囊胚形成率显著高于传统培养箱(表2-1)

风口的地方，因为较强的气流会对培养箱的稳定造成更严重的影响，尤其是对于小型桌面式培养箱,每天应对培养箱内的温度进行日常监测并做好记录。建议安装培养箱温度实时监测设备，这样不仅可以减轻实验室人员日常的工作负担，还可以方便观察到箱内温度的波动变化，以及相关因素的影馆(如开关次数、室温变化

等)。如果发现显示温度和实测温度相差超过02℃，就需要进行重新校准，但除了温度设定和校准以外(也包括气体浓度和湿度)，其他出厂时的设置和参数都不要擅自更改。保障设备在最佳的状态下运行，为配子和胚胎提供

个相对稳定的体外生长环境。

此外，近年快速发展的时差成像(imne hmp，TI)培养系统通过在培养箱内观察胚治，可以使胚胎不必暴露在外界环境中，从而减少温度的波动，既为胚胎生长提供了稳定的做环境，又提供了全面的胚胎发育动态信息。