广东人类精子库是如何判定精子存活率与精子活力指数

广东人类精子库精子检测的前向运动情况与受孕有密切的关联。在《WH0人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)中，将精子活动力分为前向运动(pogresnve modimiy，PR)、非前向运动(mopogresiremotliy，不活动NP).(imotniy，)，而不再沿用以往的将精子活动力分为、b、c、级的分类方法，这是新版手册中的一个重要修订。可采用带有网格的目镜，以更好地评估精子活动力，评估过程中所检测的区域应距离盖破片边缘至少smuy上，应在室温或带有加热37℃载物合的最制镜下进行精子活动力评估，由于精子活动力与环境温度密切相关、最好将合面温度保持恒定在37、要准确地评古绩子活动力，应将精液东分混匀后，重复取样2次分别检汉，先仔细观空网格区计数前向运动精子，接下来是在相同的网格内的非前向运动精子，最后是不活动的情子。每个样本至少系统地现察5个视野，分析的精子应>20个。2次分析结果之间的差异应在95%6可信区间内，如果两个样本之间的差异过大，则应重新混匀标本后重复取样检查。《WH0人类精液检查与处理实验室手册》(第S版)将PR32%6、(PR+NP)240%作为精子活动力的参考值下限，低于此下限时受孕的机会减低。

1.应用伊红-苯胺黑的精子存活率试验

使用苯胺黑一步染色技术，可以提高背景和与精子头之间的对比度，使精子头更易辨别。也可以保存玻片用于再次评估和作为质量控制用途,

2.应用低渗膨胀的精子存活率试验作为染料拒染法的替代试验，精子低渗膨胀试验 (hnp0osmoicsmelmng，HOS) 可以用来评估清子的存活率。当必须避免精子染色的时候，这种方法是有用的，例如，为ICSI选择情子的时候，膜完整的精子在低渗溶液中5分钟内发生膨胀，在30分钟之内所有尾部的形状是稳定的。

因此，使用该试验作为常规的诊断，孵育30分钟。但是当精子处理用于治疗用途时，孵育5分钟。

低渗膨胀试验的参考值与伊红试验的参考值相近。精子存活率(膜完整的精子)的参考值下限是58%(第5个百分位数，95%可信区间为55~63)。

每次射精的精子总数和精子浓度与妊娠时间和妊娠率存在联系，并且可以预测受孕。子总数与生殖结局相关的更多数据已被认可。精液的精子总数可以通过精液评估中测定的精子浓度来计算。对于正常射精，当男性俞精管道是畅通的且禁欲时间短的时候，精液中精子总数与睾丸体积相关，因此精子总数可以衡量睾丸产生精子的能力和男性输精管道畅通的程度。精液中精子浓度与受精率和妊娠率相关，精子浓度受精囊腺和前列腺分泌液量的乡响，不是衡重睾丸功能的特异性指标。

广东人类精子库精子浓度测定方法:

1.将充分混匀、未稀释的液化精液滴加在载玻片上，盖上盖玻片进行检查，确定合适的稀释度和使用合适的计数板。这是评估精子活力常用的湿片制备程序,

2.混匀精液，准备含有固定液的稀释液。

3.在血细胞计数板的计数池上加样，在一个湿盒中使精子沉降!

4.在10~15分钟内评估精液样本(过长时间，水分蒸发后对计数池内精子的位置会有显著影响)

5.每份重复样本计数至少200个精子

6.比较两份重复样本的数值，看其差异的接近程度是否可以接受。如果可以接受，则计算数据;如果不能接受，制备新的稀释样本。

7.计算每毫升精液中的精子浓度

8.计算每次射精的精子总数。